何首乌饮对衰老大鼠抗氧化能力及血脂的影响

中华首席医学网    2008年04月07日 21:04:35 Monday  

 

作者：李亚丽 楚伟 郭文潮 余小平 高健 张德峰 高福禄

作者单位：河北医科大学，河北 石家庄 050000

《中国老年学杂志》2008年3月28卷6期 基础研究

 

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【摘要】  目的 探讨何首乌饮的抗衰老机制。方法 采用D-半乳糖连续腹腔注射致亚急性衰老大鼠模型，测定何首乌饮灌胃后大鼠血清中血脂和丙二醛（MDA）含量、总抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽过氧物酶（GSH-Px）活性、超氧化物歧化酶（SOD）活力。结果 亚急性衰老模型组大鼠血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、MDA含量明显升高，高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、SOD、GSH-Px、T-AOC明显下降，与正常对照组大鼠比较差异显著（P＜0.05,P＜0.01），经何首乌饮灌胃治疗后TG、TC、MDA含量下降，HDL-C、SOD、GSH-Px、T-AOC含量升高均接近正常水平，与模型组大鼠有显著差异（P＜0.01）。结论 何首乌饮明显提高衰老大鼠体内的HDL-C、SOD、GSH-Px、T-AOC水平，降低TG、TC、MDA含量，何首乌饮具有抗衰老作用，其抗衰老作用可能与此有关。

【关键词】  何首乌饮；抗衰老；血脂；自由基

基金项目：国家自然科学基金资助项目（No.30572432）

　　The effect of Heshouwu decoction on anti-oxidation and blood lipid of aging rats

　　LI Ya-Li, CHU Wei, GUO Wen-Chao, et al.

　　Hebei Medical University, Shijiazhuang 050000, Hebei, China

　　【Abstract】  Objective  To explore the mechanism of Heshouwu decoction (HSWD) in anti-aging.Methods  The sub-acutely aging rats were made by ip injection D-gal continually. The parameters of serum levels of SOD, GSH-Px, T-AOC, MDA,TC,TG and HDL-C were detected after lavaging HSWD.Results  The MDA,TC,TG contents were significantly higher, while the SOD, GSH-Px, T-AOC, HDL-C content of model rats were significantly lower than those of normal rats （P＜0.05, P＜0.01）. The MDA,TC,TG contents were significantly lower, while SOD, GSH-Px, T-AOC, HDL-C contents in serum of HSWD group were significantly higher than those of model rats (P＜0.01).Conclusions  HSWD could increase the SOD,GSP-Px, T-AOC, HDL-C level and decrease the MAD, TC, TG levels in serum of sub-acutely aging rats, which has the role of delaying aging.
   
　　【Key words】  Heshouwu decoction; Anti-aging; Blood lipid; Free radicle

　　目前，国际多采用性激素替代疗法来预防衰老，其是否对老年人抗衰老有一个可靠的危险/利益比，是激素替代治疗（HRT）中一个重要问题。虽然HRT有可能达到预防衰老、延长寿命的目的，但有很多不足，如男性将面临前列腺疾病的可能，女性长期应用雌激素有导致乳腺癌和子宫内膜癌的危险。而传统中药主要是天然动、植物和矿物，副作用小，因此研制开发能延缓衰老、提高生活质量和副作用小的新药具有重要意义和前景。传统医学认为精气虚弱是导致衰老的主要原因，补肾方剂何首乌饮由《宣明论方》何首乌丸加味而成，在何首乌、肉苁蓉、怀牛膝基础上增加淫羊藿、丹参、茯苓，具有补肝肾、益精血、延年益寿之功效〔1，2〕。为确定何首乌饮的抗衰老作用及其机制，本文通过建立亚急性衰老大鼠模型，观察了何首乌饮对血脂、抗氧化系统的影响，为其应用提供理论依据。

　　1  材料与方法

　　1.1  实验动物及分组  选用清洁级8周龄雄性SD大鼠85只，体重180～220 g (购自河北医科大学实验动物学部，合格证编号:605106)。根据实验目的和要求将SD大鼠随机分为正常对照组（10只）、模型组（15只）、何首乌饮延缓衰老组（高、中、低剂量组各15只）、六味地黄丸组（15只），其中模型组、何首乌饮组和六味地黄丸组均采用D-半乳糖连续腹腔注射，造模成功后，每天灌胃何首乌饮或六味地黄丸，连续60 d；模型组每天灌胃生理盐水，时间同上。

　　1.2  动物模型的制作方法  D-半乳糖用生理盐水配制成6%的溶液,按300 mg/kg 每天腹腔注射1次,连续60 d。

　　1.3  实验药品和试剂  D-半乳糖由美国Amresco公司生产;何首乌饮方剂和六味地黄丸中药物购自承德市肛肠医院；检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、总抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛(MDA) 含量的试剂盒由南京建成生物工程研究所提供;检测血清中总胆固醇(TC) 、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白(HDL-C) 含量的试剂盒购自浙江东瓯生物工程有限公司。

　　1.4  指标的检测  大鼠经内眦于眶后静脉丛采血约2 ml，离心后取上清。每组随机抽取8例，分别检测：①按说明书操作检测血清中SOD、GSH-Px、T-AOC、MDA 的含量；②采用RT2200C 雷杜半自动生化分析仪分别检测血清中TC、TG、HDL-C的含量。

　　1.5  统计学处理  所有计量资料均以x±s表示,采用SPSS11.0 统计软件进行成组设计资料的t检验。

　　2  结果

　　2.1  各组大鼠血清抗氧化能力的变化情况  由表1可见模型组SOD活力、GSH-Px活力和T-AOC均明显下降，MDA含量明显上升，与正常对照组比较差异显著（P＜0.01）。何首乌饮各剂量组SOD活力、GSH-Px活力和T-AOC三者均有显著提高，MDA含量明显下降，与模型组比较差异显著（P＜0.01，P＜0.05），其含量接近正常组。何首乌饮各剂量组和六味地黄丸组比较，高剂量组效果最好。

　　表1  各组血清抗氧化能力和血脂水平的比较（略）

　　同模型组比较：1）P＜0.01,2）P＜0.05

　　2.2  血脂变化  模型组和正常组相比，TC、TG含量明显升高，HDL-C明显下降（P＜0.01）；何首乌饮高剂量组TC、TG含量均有显著下降，HDL-C含量明显升高，与模型组比较差异显著（P＜0.01）。见表1。

　　3  讨论
   
　　D-半乳糖诱导的亚急性衰老模型是按照衰老代谢学说建立的。长期大剂量给动物注射D-半乳糖，D-半乳糖在动物体内还原成半乳糖醇，此物质不能被组织代谢而堆积在细胞内，影响细胞正常渗透压，进而导致细胞功能障碍，代谢紊乱，产生过量自由基，最终导致机体衰老。D-半乳糖诱发的拟衰老效应，较全面体现了自然衰老状态，是应用最多的衰老模型之一〔3〕。故本研究选用腹腔大剂量注射D-半乳糖来制作衰老模型。
   
　　自由基中以活性氧自由基（ROS）最为重要。它最易与细胞膜中的不饱和脂肪酸作用，形成脂质自由基，对生物膜脂结构破坏极强，并可以氧化蛋白质等，引起特定生物功能丧失，细胞老化等。正常生理情况下，体内存在清除自由基的防御系统，包括SOD、GSH-Px、过氧化氢酶(CAT)等抗氧化酶及维生素A、C、E等抗氧化物质〔4〕。随年龄增长，机体抗氧化系统物质合成、活性均下降，清除氧自由基的能力下降，导致自由基堆积，产生大量代谢产物MDA，对机体产生损害，加速衰老。SOD对清除氧自由基，防止氧自由基破坏有重要作用；GSH-Px能特异性催化谷胱甘肽对过氧化氢的还原反应，起到保护细胞膜的作用；MDA是衡量机体内自由基代谢的敏感指标，客观反映体内自由基的水平〔5～7〕。另外，随年龄增长，机体血清TC、TG水平升高，HDL-C有下降趋势，引发高脂血症、动脉硬化等老年疾病。而血清中MDA含量与TC、TG含量呈正相关〔8〕。因此，增强体内抗氧化酶系统，降低自由基生成和TC、TG含量，是延缓衰老的重要途径。
   
　　近年研究表明，肾虚时机体SOD活性下降，消除自由基能力下降，益寿延年应以补肾为先〔9〕。何首乌明显降低老年大鼠体内MDA含量，增强SOD活性，从而消除自由基对机体的损伤，延缓衰老和疾病发生〔10〕。何首乌亦可显著降低TG、TC水平，提高血清HDL-C水平，以延缓动脉粥样硬化发展〔2〕。
   
　　本研究中以何首乌饮高剂量组疗效最好，提示，何首乌饮对机体抗氧化系统和血脂水平的调节可能是其延缓衰老的主要机制之一。

【参考文献】
  　　1 谭颖然.何首乌的抗衰老作用机制探讨〔J〕.湖南中医药导报，2004;10（3）：73-4.

　　2 罗瑞芝，贾 维，赵利斌，等.何首乌研究进展〔J〕.中草药，2005;36（7）：1097-100.

　　3 Song X，Bao M，Li D,et al.Advanced glycation in D-galactose induced mouse aging model〔J〕.Mech Ageing Dev，1999;108(3):239-51.

　　4 臧雪冰，胡怡秀，刘秀英，等.天然维生素E延缓衰老作用的实验研究〔J〕.实用预防医学，2002;9（1）：32-3.

　　5 Gardino R，Gavaresi G，Fini M,et al.The role of different chemical modifications of superoxide dismutase in preventing a prolonged muscular ischemia/reperfusion injury［J］.Artif Cells Blood Substit Immobil Biotechnol，2002;30(3):189-91.

　　6 崔云华，王晓玲，刘 晴，等.丹参酸乙的抗氧化作用对大鼠肝星状细胞增生的影响〔J〕.世界华人消化杂志，2002;10（3）：317-9.

　　7 Inal ME,Kanbak G,Sunal E.Antioxidant enzyme activities and malondialdehyde levels related to aging〔J〕.Clin Chim Acta,2001;305(1-2):75-8.

　　8 舒啸尘，李悠慧，严卫星，等.葡萄籽多酚在拟衰老模型小鼠中抗氧化功能的研究〔J〕.卫生研究，2002;31（3）：191-2.

　　9 林炳辉，方素钦，叶 盈，等.中老年人脾肾虚证实质的探讨〔J〕.中国中西医结合杂志，2002;22(1):33-6.

　　10 葛晓舒，刘群良.环少丹对老龄鼠抗氧化能力的影响〔J〕.中国现代医学杂志，2006;16（23）：3574-6.